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技术服务
Technical service

毕赤酵母蛋白表达服务

具有生长速度快、成本相对较低、易操作等优点

易于工业级别放大培养;同时具备真核细胞对蛋白的翻译后修饰的加工能力

能够获得活性高的可溶性重组蛋白

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  • 技术简介
  • 表达案例

毕赤酵母表达系统是工业微生物中应用较广泛的系统,具有生长速度快、成本相对较低、易操作等优点,易于工业级别放大培养;同时具备真核细胞对蛋白的翻译后修饰的加工能力,能够获得活性高的可溶性重组蛋白。


步骤内容交付内容周期
密码子优化及基因合成
  • 客户提供目的蛋白对应的CDS序列信息或质粒


1-2周
载体构建
  • 克隆至合适的表达载体

  • 质粒测序

  • 质粒制备及线性化

  • 测序结果

  • 线性化检测结果

1-2周
表达鉴定
  • 转化

  • 阳性克隆子筛选(PCR法)

  • 高拷贝菌株筛选(可选)

  • 表达小试(5-10菌株)

  • 表达分析鉴定(WB)

  • 定株,优化表达条件

  • 阳性表达菌株

  • PCR鉴定阳性菌株

  • 高拷贝阳性菌株(可选)

  • WB实验结果

  • 小试表达总结

  • 转化及鉴定1-2周

  • 高拷贝筛选2-3周(可选)

  • 表达小试及鉴定1-2周


纯化及鉴定
  • 放大培养2-5升

  • 表达上清液浓缩

  • Ni柱低压亲和纯化

  • PAGE分析纯化过程

  • WB鉴定纯化后蛋白

  • 蛋白纯度鉴定报告

  • 成品蛋白

  • 放大培养2-3周

  • 蛋白纯化1-2周

  • WB 1周



酵母表达案例-1.png

M:Molecular weight marker

All:All cell lysate

S:Supernatant of cell lysate

P:Precipitation of cell lysate

FT:Flow through

W1:Wash 1

W2:Wash 2

E:Elution from Ni-NTA


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