大肠杆菌蛋白表达系统_大肠杆菌蛋白表达系统_蓝景科信河北生物科技有限公司

蛋白与DNA的相互作用

DAP-seq ChIP-seq CUT&Tag EMSA DNA Pull Down 染色质转座酶可及性测序（ATAC-seq）双荧光素酶报告实验（Dual-LUC）酵母单杂交（Y1H）GUS染色实验服务
蛋白与蛋白的相互作用

Co-IP/Co-IP-MS 蛋白Pull down 酵母双杂交（Y2H）双分子荧光互补技术荧光素酶互补实验（LCA）
重组蛋白表达系统

大肠杆菌蛋白表达系统酵母蛋白表达系统哺乳细胞表达系统昆虫细胞表达系统
蛋白与RNA的相互作用

RIP-seq 体内RNA亲和纯化（RAP）RNA Pull Down RNA凝胶迁移或电泳迁移率实验（RNA-EMSA）RNA亲和纯化测序（RAP-seq）
基因组学分析

被子植物353个单拷贝核基因靶向捕获测序 Ribo-seq

大肠杆菌蛋白表达系统

遗传背景清晰、细胞增殖快

成本低、表达量高、稳定性好

抗污染能力强

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技术简介
表达案例

E. coli具有遗传背景清晰、细胞增殖快、成本低、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点，适用于多种蛋白的表达。大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用广泛且经济实惠的蛋白表达系统。缺点是该表达系统易形成包涵体，含有内毒素，没有翻译后修饰的加工功能。该系统适用于表达原核来源的蛋白或不需要翻译后修饰的真核来源蛋白，特别是小分子蛋白。

蓝景科信拥有丰富的E. coli蛋白表达纯化经验，熟练运用多种表达宿主菌，提供多种表达载体和标签的选择。

原核E.coli蛋白表达服务内容
步骤	内容	交付内容	周期
密码子优化及基因合成	客户提供目的蛋白对应的CDS序列信息或质粒		1-2周
载体构建	克隆至合适的表达载体质粒测序质粒制备	测序结果	1-2周
表达鉴定	10 mL小量表达 3种表达条件尝试蛋白表达评估(SDS-PAGE)	表达评估报告	1-2周
大量表达和纯化	蛋白纯化(可溶表达) 蛋白变性复性纯化 (包涵体) QC分析(SDS-PAGE)	1-3 mg纯化蛋白，纯度>85%	1-2周
工业级表达及纯化（可选）	放大培养（根据具体需求量）亲和纯化纯化蛋白检	蛋白纯度鉴定报告成品蛋白	根据表达体积商定

引用文献：

任增亮, 堵国成, 陈坚,等. 大肠杆菌高效表达重组蛋白策略[J]. 中国生物工程杂志, 2007, 27(9):103-109.

Rosano G L , Ceccarelli E A . Recombinant protein expression in Escherichia coli: advances and challenges[J]. Frontiers in Microbiology, 2014, 5(172):172.

Baneyx F. Recombinant protein expression in Escherichia coli. Curr Opin Biotechnol. 1999 Oct;10(5):411-21. doi: 10.1016/s0958-1669(99)00003-8. PMID: 10508629.

HAYAT, SEYED MOHAMMAD GHEIBI, FARAHANI, NAJMEH, GOLICHENARI, BEHROUZ, et al. Recombinant Protein Expression in Escherichia coli (E.coli): What We Need to Know[J]. Current pharmaceutical design,2018,24(6):718-725. DOI:10.2174/1381612824666180131121940.

原核表达案例-1.png

M：Molecular weight marker

S：Supernatant of cell lysate

P：Precipitation of cell lysate

FT：Flow through

W1：Wash 1

W2：Wash 2

W3：Wash 3

E：Elution from Ni-NTA