- 技术简介
- 表达案例
杆状病毒-昆虫细胞表达系统具有较高的表达水平及翻译后修饰功能,可以提高重组蛋白的活性,是一种表达大规模蛋白的强有力的工具。其翻译后修饰类似于哺乳动物细胞,适用于表达一些可能对哺乳动物宿主细胞产生负作用的蛋白,如激酶以及毒性蛋白等。
实验步骤 | 内容 | 交付内容 | 周期 |
密码子优化及基因合成(可选) | 客户提供目的蛋白对应的CDS序列信息 | 1-2周 | |
载体构建 | 克隆至合适的表达载体 制备重组的Bacmid | 测序结果 | 2-3周 |
表达鉴定 | 转染昆虫细胞, 制备病毒贮液, 空斑实验测定病毒滴度 检测并优化表达条件 | 表达鉴定报告 蛋白样品 | 4-5周 |
放大培养及蛋白纯化 | 放大培养(根据客户需求量) Ni柱亲和纯化 纯化蛋白检测 | 蛋白纯度鉴定报告 成品蛋白 (依据表达小试结果约定) | 根据表达体积商定 |
M:Molecular weight marker S:Supernatant of cell lysate P:Precipitation of cell lysate B:Beads before Elution E1:Elution 1 B1:Beads after Elution 1 E2:Elution 2 B2:Beads after Elution 2 |