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技术服务
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  • Ribo-seq

    Ribo-seq

    检测正在翻译的RNA信息,连接转录组学与蛋白质组学的桥梁 Ribo-seq(Ribosome Profiling:核糖体印迹测序)通过识别与核糖体结合的mRNA,对正在翻译的RNA 片段(Ribo-some ProtectFragments,RPFs)进行捕获和测序。通常,将Ribo-seq与RNA-seq数据进行联合分析,计算蛋白质的合成速率,从转录后翻译水平分析翻译效率。通过Ribo-seq分析能够鉴定新的sORF和微蛋白,发掘ncRNA的功能特征以及发现新颖的翻译调控机制。

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  • RNA凝胶迁移或电泳迁移率实验(RNA-EMSA)

    RNA凝胶迁移或电泳迁移率实验(RNA-EMSA)

    RNA-EMSA(RNA-Electrophoretic Mobility Shift Assay)是一种快速灵敏的检测蛋白-RNA互作的技术方法,RNA-EMSA是将标记的RNA与蛋白质共同孵育,当形成复合物后,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶对RNA-蛋白质复合体进行电泳。 与游离的RNA探针相比,RNA-蛋白质复合体的迁移速度较慢,可以在凝胶上观察到阻滞条带。通过RNA-EMSA实验可以检测或验证RNA与蛋白质的相互作用、蛋白质在RNA上的结合序列等。

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  • RNA Pull Down

    RNA Pull Down

    RNA Pull Down是根据已知的RNA序列,设计DNA模板,然后使用体外转录技术合成生物素标记的RNA探针,并与蛋白提取液进行孵育,形成RNA-蛋白质复合体。使用链霉亲和素磁珠纯化富集RNA-蛋白质复合体,将富集到的蛋白质进行LC-MS/MS检测,最终鉴定出与RNA互作的蛋白质。

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  • 体内RNA亲和纯化(RAP)

    体内RNA亲和纯化(RAP)

    体内RNA亲和纯化(RNA Affinity Purification,RAP)是根据感兴趣的已知RNA序列,设计与RNA序列互补的生物素标记的DNA捕获探针,同时将RNA与蛋白质在体内进行交联,然后使用DNA捕获探针,将与目的RNA结合的复合物沉淀下来,进行LC-MS/MS检测,鉴定出目的RNA的结合蛋白。

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  • RNA免疫共沉淀测序(RIP-seq)

    RNA免疫共沉淀测序(RIP-seq)

    RNA免疫共沉淀测序(RNA Immunoprecipitation Sequencing,RIP-seq),是研究细胞内RNA与蛋白质结合的技术。原理是利用目标蛋白的特异性抗体将相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,经过富集和纯化后,对结合在复合物上的RNA进行高通量测序,从而在全转录组范围内分析细胞内RNA与蛋白的结合情况,揭示RNA分子与RNA结合蛋白(RBP)的相互作用,包括非编码RNA与蛋白的互作。

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