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毕赤酵母蛋白表达服务
毕赤酵母表达系统是工业微生物中应用较广泛的系统,具有生长速度快、成本相对较低、易操作等优点,易于工业级别放大培养;同时具备真核细胞对蛋白的翻译后修饰的加工能力,能够获得活性高的可溶性重组蛋白。
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大肠杆菌蛋白表达系统
E. coli具有遗传背景清晰、细胞增殖快、成本低、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点,适用于多种蛋白的表达。大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用广泛且经济实惠的蛋白表达系统。
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蛋白Pull down
蛋PullDown技术是体外研究蛋白质相互作用的经典方法。基于亲和层析原理,将诱饵蛋白与特定标签(如Halo、GST、His、FLAG等)形成融合蛋白进行表达纯化,进而捕获并鉴定与之相互作用的蛋白。该技术主要应用于两大方向:一是鉴定与已知“诱饵蛋白”结合的未知互作蛋白,二是验证两个已知蛋白间的直接相互作用,为解析蛋白质功能及细胞信号转导调控机制等研究提供关键实验支撑。 本公司主要提供Halo/GST-tag pulldown:Halo-tag pulldown是使用体外真核表达系统来表达目的蛋白,表达的目的蛋白携带Halo标签;GST-tagpull down是使用大肠杆菌诱导表达目的蛋白,表达的目的蛋白携带GST标签,也可以利用其它标签蛋白进行pulldown实验。
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Co-IP/Co-IP-MS
免疫共沉淀(Co-IP)以抗体与抗原的特异性结合为基础,研究蛋白质与蛋白质相互作用的经典方法。利用免疫共沉淀可以检测两个已知蛋白之间的相互作用,或者寻找与已知蛋白相互作用的未知蛋白。免疫共沉淀的优势在于蛋白的结合是在细胞内完成,能够反应天然状态下的蛋白质相互作用,结果更加真实可靠。 当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质相互作用被保留了下来,使用结合抗体的磁珠与细胞裂解液共同孵育,抗体会和诱饵蛋白特异性结合,同时与诱饵蛋白结合的蛋白也会固定在磁珠上,洗去上清,再将磁珠上的蛋白洗脱下来进行免疫印迹检测或者质谱检测,将鉴定到与诱饵蛋白相互作用的蛋白质。
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凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术。 基于生物素标记探针与对应的DNA结合蛋白的特异性结合原理,通过设计合理、科学的实验方案,蓝景科信为您提供验证性EMSA,竞争性EMSA以及超迁移EMSA(Super-shift EMSA)实验服务。
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